اتصال عامل بیولوژیکی به نانو ذرات اکسید آهن و جداسازی مغناطیسی آن ها

در این تحقیق، نانوحسگر بیولوژیکی fe3o4/igg ساخته شد که توانایی تشخیص و جداسازی مقادیر کم باکتری های بیماری زا استافیلوکوک ساپروفیتیکوس ، استافیلوکوک اورئوس و استرپتوکوک پیوژنز را دارد. سپس به منظور انجام این جداسازی در شرایط استریل و انجام آزمایش با مقادیر کم از نمونه موردنظر به ساخت میکروکانال پرداختیم. برتری این روش جداسازی، حساسیت بالا و سرعت تشخیص آن نسبت به روش های رایج می باشد. ابتدا نانوذرات اکسید آهن از روش همرسوبی ساخته شد و برای تعیین ویژگی های فیزیکی این نانو ذرات از تکنیکهای sem ، xrd وftir استفاده شد و مشخصاتی مانند نوع فاز، اندازه، مورفولوژی ذارت ، تعیین ساختار وخواص مغناطیسی آن ها مشخص گردید. بررسی ریزساختاری semنشان داد که نانوذراتی با میانگین ابعاد22 نانومتر تشکیل شده است که به خوبی تبلور یافته اند. نتایج آزمون xrd نشان داد که ذرات عمدتاً از نوع مگنتیت می¬باشند. در مرحله دوم به تخلیص ایمونوگلوبولین (igg) از نمونه سرم خون انسان پرداخته شد. تخلیص شامل سه مرحله salting out، دیالیزو کروماتوگرافی تعویض یونی است. برای تعیین غلظت، جداسازی و تعیین پیوندها از تست بردفورد، الکتروفورز و ftir استفاده شد که تست بردفورد غلظت میانگین mg/ml5 را نشان داد و در طیف سنجی ftir پیوند گروه های عاملی مختلف مشاهده شد. پیوند بین ایمونوگلوبولینg و نانو ذرات اکسید آهن کووالانسی می باشد و تثبیت از طریق گروه های کربوکسیل آنتی بادی است. در طیف سنجی ftir فرینه های مربوط به نوسانات کششی انتقال یافته و نشان دهنده این است که رادیکال های ایمونوگلوبولینg به سطح مگنتایت چسبیده اند. سپس باکتری استافیلوکوک ساپروفیتیکوس در غلظت های مختلف تهیه شد و توسط این زیست حسگر بیولوژیکی از محلول حاوی این باکتری با اعمال میدان مغناطیسی جداسازی و با استفاده از طیف سنجی ftir اتصال زیست به باکتری ها نشان داده شد. توسط میکروسکوپ الکترونی روبشی(sem) باکتری جداشده از محلول حاوی باکتری با غلظت cfu/ml102^3 نشان داده شد. در مرحله بعد میکروکانال سیالی با استفاده از لیتوگرافی نوری، لیتوگرافی نرم و اعمال پلاسما ساخته شد. ایمونوگلوبولینg مغناطیسی شده تحت میدان مغناطیسی اعمال شده توسط آهن ربا درون میکروکانال قرارگرفته و جداسازی در این میکروکانال تست شد.